高效液相色谱法分析胞内S-腺苷-L-甲硫氨酸含量及其合成酶活性的优化研究

作者：姚高峰; 秦秀林; 储炬; 钱江潮

来源：化学与生物工程, 2011, (06): 83-86+91.

• S-腺苷-L-甲硫氨酸
• S-腺苷-L-甲硫氨酸合成酶
• 高效液相色谱 S-adenosyl-L-methionine(SAM)
• S-adenosyl-L-methionine synthetase
• HPLC

对重组毕赤酵母胞内S-腺苷-L-甲硫氨酸(SAM)含量以及SAM合成酶活性的高效液相色谱(HPLC)测定方法进行了优化。通过调整流动相浓度和洗脱程序,建立了保留时间适中、分离效果好的SAM定量分析方法。结果表明,SAM浓度在0.05~0.5 g.L-1时,其峰面积与浓度线性关系良好,相关系数为0.99996,平均回收率为99.3%~100.5%,相对标准偏差为0.72%~0.98%。该方法对胞内以及酶活测定液中的SAM能够进行有效分离,精密度高、稳定性好,能高效、准确地分析发酵过程菌体中SAM含量以及SAM合成酶活性。

• 单位
  华东理工大学; 生物反应器工程国家重点实验室