草地早熟禾硝酸盐转运蛋白NRT2.4基因序列的克隆及表达分析

作者：陈阳; 金一锋^*; 金忠民; 王玉书; 蔡荣建; 邵竹林; 王杰

来源：华北农学报, 2021, 36(02): 1-8.

• 草坪草
• 草地早熟禾
• NRT2.4
• 氮素营养胁迫
• 克隆
• 表达

植物硝酸盐转运蛋白(Nitrate transporter, NRT)可有效调节与转运NO-3,提升氮素利用效率。分析草地早熟禾硝酸盐转运蛋白NRT2.4基因在不同氮素浓度下的表达规律,旨在揭示硝酸盐转运蛋白NRT2.4基因在氮素调控中扮演的角色。以草地早熟禾为材料,首先设计特异引物,利用RT-PCR技术克隆得到草地早熟禾NRT2.4基因cDNA序列,其长度为1 694 bp,包含一个1 257 bp的CDS区,编码418个氨基酸序列,属于Nitrate/nitrite transporter NarK超级家族1,与二穗短柄草、节节麦NRT2.4基因高度同源。第6,7个跨膜区之间有一段MFS家族所特有的序列特征:G-X3-D-X2-G-X-R,第4个跨膜区有典型的NO-3/NO-2转运载体特征序列:A-G-W-G/A-N-M-G,第8个跨膜区之后含有保守的蛋白激酶C识别基序(S/T-X-R/K):SKR。利用qRT-PCR方法,测定草地早熟禾NRT2.4基因表达水平存在组织特异性,叶部表达量最多,硝态氮利于NRT2.4基因的表达,氮饥饿和高浓度NaNO3水培液处理均利于NRT2.4基因的表达。上述结果为草地早熟禾硝酸盐转运蛋白NRT2.4在草坪草抗逆基因工程中的应用提供理论依据。

• 单位
  齐齐哈尔大学