非洲马瘟病毒VP7蛋白的原核表达及其间接ELISA方法的建立

作者：潘佳亮; 高利; 相文华; 戚亭; 郭巍

来源：中国兽医科学, 2013, (03): 256-260.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2013.03.004

• 非洲马瘟病毒
• VP7蛋白
• 间接酶联免疫吸附试验 African horse sickness virus
• VP7 protein
• indirect ELISA

为了建立可特异性地检测血清中非洲马瘟病毒抗体的方法,优化并合成非洲马瘟病毒VP7蛋白基因,将其插入原核表达载体pET-30a(+)中,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行表达。SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,目的蛋白获得了高效表达,且有特异的免疫学活性。用纯化的重组蛋白作为检测抗原,建立了检测血清中非洲马瘟病毒抗体的间接ELISA方法,并对该间接ELISA的抗原包被量、血清稀释度、封闭液的选择等反应条件进行了优化。所建立的间接ELISA方法可以鉴别血清中的非洲马瘟病毒抗体,具有良好的特异性和灵敏性,与标准竞争ELISA试剂盒的符合率达100%。表明本研究建立的检测...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 东北农业大学; 兽医生物技术国家重点实验室