肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体表达载体的构建

作者：王劭晟; 徐波; 夏金堂; 伍兆锋; 何绮微

来源：中山大学学报(医学科学版), 2007, S1: 29-31.

DOI：10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2007.0171

• 肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(TRAIL)
• 腺相关病毒
• 基因治疗

[目的]构建一种携带肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(TRAIL)基因的重组腺相关病毒载体。[方法]首先构建携带可溶性肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(sTRAIL)基因的穿梭质粒pAAV-sTRAIL,将穿梭质粒共转染入HEK293细胞中,采用细胞内质粒DNA同源重组法构建重组腺相关病毒rAAV-sTRAIL。以噬斑分析法筛选单克隆重组腺相关病毒:PCR法鉴定阳性重组腺相关病毒;氯化铯密度梯度离心法纯化病毒;紫外分光光度仪测定病毒颗粒数及纯度,噬斑分析法测定病毒感染滴度;Western blot检测rAAV-sTRAIL在293细胞中的表达情况。[结果]成功构建了重组腺相关病毒载体rAAV-...

• 单位
  广州市第一人民医院; 广州市荔湾区人民医院