小鼠IL-1β原核表达及其与在布鲁氏杆菌侵染巨噬细胞中差异表达的初步研究

作者：杨馨; 邹德颖; 张凯; 常江; 常恒祯; 战俊澎; 郭珣; 刘益辛; 程梦妍; 韩成; 胡盼; 卢士英; 李岩松; 柳增善; 任洪林^*

来源：湖北农业科学, 2022, 61(06): 112-121.

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2022.06.021

• 布鲁氏杆菌(Brucella)
• 原核表达
• 多克隆抗体
• IL-1β
• MyD88

为研究IL-1β在布鲁氏杆菌（Brucella）侵染小鼠巨噬细胞过程中的表达情况，首先构建重组小鼠IL-1β原核稳定表达系统，免疫新西兰兔获得多克隆抗体，通过ELISA检测血清效价，并通过Western blot分析其活性，再以感染复数（multiplicity of infection,MOI）为1∶100（细菌∶细胞）建立猪种布鲁氏杆菌S2株侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7的模型，利用RT-PCR检测细菌侵染过程中IL-1β和MyD88 mRNA的变化水平；Western blot分析IL-1β在蛋白水平的变化。结果表明，重组蛋白IL-1β分子质量31 ku，多克隆抗体效价为1∶256 000，并且具有良好的特异性；与对照组相比，感染后IL-1β mRNA和IL-1β蛋白表达上调，胞内细菌数减少。猪种布鲁氏杆菌S2株侵染巨噬细胞IL-1β的表达量随时间变化并影响胞内活菌数。

• 单位
  吉林大学