摘要
目的探讨超声微泡介导miR-1290通过调节DKK3表达对卵巢癌细胞增殖、凋亡、侵袭的作用机制。方法将对数期SKOV3细胞分为对照组(Control)、miR-1290 NC组、微泡处理(MB)组、miR-1290 inhibitor组、miR-1290 inhibitor-MB组。双荧光素酶实验验证miR-1290与DKK3的靶向关系;RT-PCR检测SKOV3细胞中miR-1290与DKK3 mRNA的表达;MTT法检测SKOV3细胞活性;流式细胞仪检测SKOV3细胞凋亡情况;细胞划痕实验和Transwell实验检测SKOV3细胞迁移侵袭能力;Western blot检测蛋白表达。结果双荧光素酶实验证明, miR-1290与DKK3有靶向关系, miR-1290可负靶向调控DKK3;与miR-1290 NC组[24、48、72 h:(0.53±0.05)、(0.82±0.06)、(1.24±0.06)]比较, MB组[24、48、72 h:(0.43±0.06)、(0.71±0.03)、(1.03±0.03)]、miR-1290 inhibitor组[24、48、72 h:(0.41±0.03)、(0.66±0.04)、(0.78±0.05)]、miR-1290 inhibitor-MB组[24、48、72 h:(0.33±0.04)、(0.54±0.05)、(0.67±0.06)]SKOV3细胞增殖活性明显下降(P<0.05)。与miR-1290 NC组SKOV3细胞迁移率、侵袭数目[(45.98±4.11)%、(235.14±5.78)个]比较, MB组[(36.77±4.24)%、(189.57±4.58)个]、miR-1290 inhibitor组[(32.14±3.78)%、(165.35±5.01)个]、miR-1290 inhibitor-MB组SKOV3细胞迁移率、侵袭数目[(20.40±3.01)%、(86.21±4.23)个]明显下降, SKOV3细胞中DKK3 mRNA及蛋白表达、细胞凋亡率、促凋亡蛋白C-Caspase-3、Bax表达显著上升(P<0.05);miR-1209 NC组与Control组SKOV3细胞上述指标无显著差异(P>0.05)。结论 miR-1290可负向调DKK3表达, 而超声微泡可下调miR-1290表达, 上调DKK3表达, 从而抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖和迁移侵袭, 促进癌细胞凋亡。
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