摘要

羊快疫(Braxy)是由腐败梭菌引起的急性、致死性传染病,迫切需要建立一种针对羊快疫等腐败梭菌病的快速诊断方法,进行有效检测和防治。因此,本研究创新性地发明了新型腐败梭菌培养方法,并以此为基础,建立了腐败梭菌胶体金检测方法和腐败梭菌类毒素疫苗。胶体金试纸条所制备抗体效价可达到1:1024000,纯化后的抗体最适标记量为10μg/ml,经测定最适标记pH为8.0,胶体金-抗体结合物原液的最佳工作浓度稀释比为1:4。本实验所制备类毒素疫苗免疫小鼠21 d后血清中腐败梭菌毒素抗体效价达到1:6 400,接种3.5 ml腐败梭菌类毒素疫苗绵羊免疫21 d后,血清小鼠中和效价达到1:600。经检测,腐败梭菌胶体金检测方法具有较好的特异性和灵敏性,腐败梭菌类毒素疫苗有效抗原成分高,免疫效果理想,抗体效价较高且维持时间较长,为羊快疫的诊断和防控提供了理论依据。