摘要
目的:观察黄芪甲苷(Astragaloside Ⅳ)对非小细胞肺癌A549细胞增殖侵袭迁移及免疫球蛋白样转录子4(Immunoglobulin-like Transcript 4,ILT4)的信使核糖核酸(Msessenger RNA,mRNA)和蛋白表达水平的影响,初步探讨黄芪甲苷抑制非小细胞肺癌增殖侵袭迁移的机制。方法:A549细胞常规培养于含血清DMEM培养基中,四唑盐(Methy Thiazolyl Tetrazolium,MTT)实验设置对照组(加入完全培养基)与加药组(分别加入浓度为20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、100μmol/L的黄芪甲苷溶液),测其24 h、48 h、72 h的光密度(Optical Density,OD)值,进而检测黄芪甲苷对A549细胞增殖影响;Transwell实验设置对照组(上室加入不含胎牛血清的DMEM培养液)与加药组(上室加入用不含胎牛血清的DMEM培养液配制的浓度为40μmol/L的黄芪甲苷溶液),观察穿过小室的细胞数量的多少,进而检测黄芪甲苷对A549细胞侵袭能力的影响;划痕实验检测黄芪甲苷对A549细胞迁移的影响;细胞传代后继续培养24小时,分为对照组(加入完全培养基)与加药组(加入完全培养基稀释的浓度为40μmol/L的黄芪甲苷溶液),采用实时荧光定量(Quantitative Real-time,qRT)-聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)、免疫印迹试验(Western Blot,WB)法检测ILT4的mRNA和蛋白表达水平。结果:MTT实验、Transwell实验、qRT-PCR、Western blot实验均证实,黄芪甲苷组与对照组比较,黄芪甲苷组明显抑制了A549细胞增殖、侵袭与迁移,且其作用具有时间-浓度依赖性;ILT4蛋白与m RNA表达水平均显著降低(P <0.05)。结论:黄芪甲苷可抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、侵袭与迁移,其机制可能为通过调控免疫球蛋白样转录子4的mRNA和蛋白表达,抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、侵袭与迁移能力。
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