摘要
目的探讨微小RNA133b(miRNA-133b)在胃癌中的表达及其对人胃癌细胞MKN-1增殖能力的影响,分析其与胃癌患者临床特征和预后的关系。方法收集80例同一胃癌患者的胃癌组织、癌旁组织及正常胃黏膜上皮组织标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测3种组织以及人胃癌细胞MKN-1和人正常胃黏膜细胞GES-1中miRNA-133b的表达情况。将转染miRNA-133b模拟物(miRNA-133b mimics)和miRNA-133b阴性对照(miRNA-133b NC)的人胃癌细胞MKN-1分别作为miRNA-133b mimics组和miRNA-133b NC组,将仅加入LipofectamineTM2000的人胃癌细胞MKN-1作为对照组。采用qRT-PCR法检测转染效果,CCK-8法检测上调miRNA-133b表达对人胃癌细胞MKN-1增殖情况的影响,蛋白质印迹法(Western blot)检测上调miRNA-133b表达后人胃癌细胞MKN-1中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(BAX)、cleaved胱天蛋白酶3(cleaved caspase 3)的表达情况。分析胃癌组织中miRNA-133b的表达与患者临床特征及预后的关系。结果 miRNA-133b在人胃癌细胞MKN-1中的相对表达量明显低于人正常胃黏膜细胞GES-1(P﹤0.01)。miRNA-133b在胃癌组织中的相对表达量低于癌旁组织和胃黏膜上皮组织(P﹤0.05)。转染后,miRNA-133b mimics组人胃癌细胞MKN-1中miRNA-133b的相对表达量高于miRNA-133b NC组和对照组,相对细胞存活比例低于miRNA-133b NC组和对照组,Bcl-2蛋白的相对表达量低于对照组和miRNA-133b NC组,BAX和cleaved caspase 3的相对表达量高于对照组和miRNA-133b NC组(P﹤0.05)。不同肿瘤直径、分化程度、浸润深度、淋巴结转移数量和TNM分期胃癌患者胃癌组织中miRNA-133b的表达水平比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。miRNA-133b高表达胃癌患者的中位生存时间长于miRNA-133b低表达胃癌患者(P﹤0.05)。结论 miRNA-133b可调控胃癌细胞的增殖过程,影响凋亡相关蛋白的表达,其表达的下调提示胃癌患者预后不良,miRNA-133b具有成为胃癌患者预后预测分子标志物的潜力。
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