线粒体途径参与LASS2/TMSG1基因诱导人肺癌95C细胞凋亡的机制

作者：李艳伟; 刘水仙; 刘峥璐; 徐晓艳^*

来源：临床与实验病理学杂志, 2022, 38(12): 1426-1431.

DOI：10.13315/j.cnki.cjcep.2022.12.004

• 肺肿瘤
• LASS2/TMSG1
• 肿瘤转移抑制基因
• 线粒体途径
• 凋亡

目的 探讨LASS2/TMSG1对人肺癌95C细胞增殖和凋亡的影响及发病机制。方法 采用RT-PCR、Western blot法检测LASS2/TMSG1在人不同转移潜能肺癌细胞系95C(低转移潜能)和95D(高转移潜能)中的表达。应用慢病毒转染法将靶向沉默LASS2/TMSG1基因的LV-CERS2-RNAi(30011-1)转染至95C细胞；流式细胞术及MTT检测肿瘤细胞的体外增殖和凋亡情况；倒置显微镜观察细胞常规培养下的状态，透射电镜观察细胞线粒体超微结构的变化；荧光显微镜结合JC-1染液观察细胞线粒体膜电位的变化；Western blot法检测细胞中LASS2/TMSG1、Akt3、P-Akt3、Bax、BCL-2的表达水平。结果 LASS2/TMSG1在95C细胞中的mRNA(t=16.85,P=0.004)及蛋白表达水平(t=15.26,P=0.004)明显高于95D细胞；LASS2/TMSG1沉默后，95C细胞中LASS2/TMSG1 mRNA (F=164.053,P<0.001)和蛋白(F=18.293,P=0.003)的表达明显降低；流式细胞术检测LASS2/TMSG1基因沉默组细胞的凋亡率明显降低(F=17.340,P=0.003);MTT检测显示LASS2/TMSG1沉默组细胞从第4天(F=66.318,P<0.001)、第5天(F=224.582,P<0.001)开始，细胞增殖率明显增高；电镜和荧光显微镜观察发现，LASS2/TMSG1基因沉默，对线粒体膜电位水平的下降有干扰作用(F=14.687,P=0.005);P-Akt3蛋白(F=28.628,P<0.001)及BCL-2蛋白(F=6.049,P=0.036)表达水平升高；Akt3、Bax蛋白表达量无相关性。结论 LASS2/TMSG1基因可能抑制V-ATPase活性，使细胞内H+浓度升高，线粒体膜电位降低，线粒体凋亡通路中的相关蛋白释放促进95C细胞凋亡。

• 单位
  基础医学院; 内蒙古医科大学