鸡传染性支气管炎病毒nsp4蛋白多克隆抗体制备及其生物学功能研究

作者：卢彦澎; 林丽婷; 任丽娜; 晋英浩; 张桃妮; 张愉; 韦兰萍; 吕迪; 磨美兰^*

来源：南方农业学报, 2023, 1-16.

• 传染性支气管炎病毒
• nsp4
• 多克隆抗体
• 反应性
• 特异性

【目的】筛选出鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus，IBV)非结构蛋白4(non-structural protein 4，nsp4)抗原性较好的氨基酸区域并制备多克隆抗体，为进一步研究nsp4在IBV复制过程中的功能提供物质基础，也为IBV新型诊断试剂盒与疫苗开发打下基础。【方法】对IBV Beaudette株nsp4蛋白进行原核表达，以重组nsp4蛋白作为免疫原免疫日本大耳白兔和健康阴性鸡制备相应的兔和鸡多克隆抗体，并对制备的多克隆抗体进行生物学功能研究。【结果】Western blotting鉴定结果表明，表达的重组nsp4蛋白为13.6 kD，与预计结果相符；且其能与IBV GX-YL5株和M41株全病毒阳性血清反应。间接ELISA结果表明，制备的nsp4蛋白兔和鸡多克隆抗体血清效价分别达1:128000和1:6400。Western blotting验证表明2种多克隆抗体均能与重组nsp4蛋白和IBV全病毒反应；间接免疫荧光试验(IFA)验证表明2种多克隆抗体均与IBV GX-YL5株、Beaudette株和M41株感染鸡胚肾细胞(CEK)表达的nsp4蛋白反应；且能与转染状态以感染Beaudette株的非洲绿猴肾细胞(Vero)表达的nsp4蛋白反应；过表达nsp4 蛋白可促进IBV的复制。【结论】成功制备了具有良好反应性和特异性的IBV nsp4蛋白兔和鸡多克隆抗体，并表明nsp4蛋白可促进IBV复制，为IBV检测和深入研究IBV nsp4的生物学功能奠定了基础。

• 单位
  广西大学