NOV基因真核表达载体的构建及在COS-7细胞中的表达

作者：李成仁; 蔡文琴; 苏炳银; 张成岗

来源：第三军医大学学报, 2005, (12): 1187-1189.

• NOV基因
• RT-PCR
• 基因克隆

目的　获得NOV基因真核表达载体并检测其在细胞中的表达。方法　利用逆转录 多聚酶链反应(RT PCR)方法,从新鲜大鼠大脑组织的总cDNA中扩增出1165bp的NOV基因的cDNA编码区序列,然后用HindⅢ和BamHⅠ双酶切后定向克隆入真核表达载体pcDNA3 1 Myc His(+ ) lacZ质粒中,用脂质体法将载体转染入COS 7细胞中,用Westernblot和免疫细胞化学方法检测其表达情况。结果　NOV基因cDNA已经正确克隆到真核表达载体pcDNA3 .1 Myc His(+ ) lacZ质粒中;体外转染入COS 7细胞中后,可见转染细胞有NOV蛋白的表达。结论　本实验所构建的重组质粒为NOV基因的作用研究提供了有利的分子工具。

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学