O型口蹄疫病毒样颗粒编码基因的真核表达载体构建及表达

作者：李淑萍; 孙世琪; 莫亚霞; 胡永浩^*; 郭慧琛^*

来源：动物医学进展, 2019, 40(01): 1-6.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.20180427.001

• 口蹄疫病毒
• 重组真核表达载体
• pVAX-VP0VP1VP3构建和表达
• 病毒样颗粒

为了构建O型口蹄疫病毒(FMDV)病毒样颗粒编码基因的真核表达载体,将FMDV结构蛋白VP0、VP1、VP3的基因分别克隆到真核表达载体pVAX1中,再分别通过带有BsmBⅠ、EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点的引物,分别对重组质粒pVAX-VP0、pVAX-VP1和pVAX-VP3扩增后进行酶切,用T4连接酶连接得到重组的真核表达载体pVAX-VP0VP1VP3。对重组真核表达载体pVAX-VP0VP1VP3进行PCR鉴定并测序。用脂质体将重组真核表达载体pVAX-VP0VP1VP3转染BHK-21细胞,用间接免疫荧光试验(IFA)及Western blot检测重组真核表达载体pVAX-VP0VP1VP3在细胞中的表达情况。结果表明,成功构建了重组真核表达载体pVAX-VP0VP1VP3,并在BHK-21细胞中得到表达。

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 甘肃农业大学