Smoothened慢病毒干扰载体的构建及其对人牙周膜干细胞增殖与分化的影响

作者：张洁; 常慧君; 李雨轩; 舒绍兵; 罗金英; 徐志玲; 汤玲; 杨彦春; 周继祥

来源：第三军医大学学报, 2013, (11): 1133-1136.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2013.11.015

• Smoothened
• RNA干扰
• 慢病毒
• 人牙周膜干细胞 smoothened
• RNA interference
• lentivirus
• human periodontal ligament stem cells

目的体外构建及筛选人Smoothened(SMO)基因的慢病毒干扰载体,使用此载体下调人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,PDLSCs)中SMO基因表达并检测其对细胞增殖与分化的影响。方法针对人SMO基因设计3条干扰序列,构建RNA干扰慢病毒载体,在293FT细胞中包装病毒液并转染293A细胞,通过实时荧光定量PCR检测干扰效率,得到具有最佳干扰效率的病毒后,转染PDLSCs,用Western blot检测其对PDLSCs中SMO基因的干扰效果及对细胞分化的影响,CCK-8法检测其对PDLSCs增殖的影响。结果成功构建3个SMO慢病毒干扰...

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学