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摘要
本发明公开了一种用细胞膜上磷脂酰丝氨酸外翻染色评价细菌的类凋亡衰退的方法。该方法包括：将含待检测细菌的液体培养基离心,重悬,静置,离心,得到固定处理后的细菌；加入无菌磷酸盐缓冲液,重悬得到细菌悬浮液；将溶菌酶溶液加入细菌悬浮液中,溶壁,离心,得到溶壁后的细菌；将溶壁后的细菌与无菌磷酸盐缓冲液混匀,得到细菌稀释液；将AVF染料和染色结合液加入细菌稀释液中,染色；用流式细胞仪检测荧光强度,得到红色荧光强度数值和绿色荧光强度数值。该细菌细胞染色方法操作简单,染色效果明显,是首次将以往用于真核细胞凋亡染色的AVF染色法进行染色阻碍去除、染色假阳性消除等改进,并使之适用于细菌细胞类凋亡衰退评价的方法。
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