迟缓爱德华氏菌TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

作者：杨俊; 聂福平; 李应国; 张欢; 王昱; 刘生峰; 袁飞; 张雷; 吴蕊; 唐昌杰; 陈冉越; 王国民

来源：中国兽医科学, 2018, 48(08): 953-957.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2018.0149

• 迟缓爱德华氏菌
• 实时荧光PCR
• gyr B基因

为建立一种快速、敏感检测迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)的方法,本研究根据E.Tarda的促旋酶B亚单位基因(gyr B)保守区设计特异性引物和Taq Man探针,并优化检测反应条件,建立了E.tarda的Taq Man实时荧光PCR检测方法。结果显示,该方法仅对E.tarda的靶基因扩增呈阳性,而对创伤弧菌、福氏志贺氏菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、单核增生性李斯特菌、肠炎沙门菌、溶藻弧菌、阪崎肠杆菌、大肠杆菌O157、温和气单胞菌、嗜水气单胞菌、霍乱弧菌等相关致病菌检测结果均为阴性,特异性良好;该方法对E.tarda检测的灵敏度为20 CFU/m L;重复性试验表明,该方法的变异系数在0.95%2.44%之间,具有良好的重复性。本研究结果表明,建立的E.tarda Taq Man实时荧光PCR方法灵敏、快速、特异性强、重复性好,适用于E.tarda检疫、疫情监测及流行病学调查。

• 单位
  中国检验检疫科学研究院; 重庆出入境检验检疫局