非复制型痘苗病毒修饰株NTV-C7L构建及毒力初步评价

作者：张鹏; 赵颖; 赵莉; 任姣; 谭文杰; 田厚文^*

来源：中华实验和临床病毒学杂志, 2020, 34(01): 72-77.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2020.01.015

• 非复制型痘苗病毒修饰株NTV-C7L
• 毒力
• 痘苗病毒载体

目的 通过构建非复制型痘苗病毒修饰株NTV-C7L,在细胞和小鼠体内分别评价病毒毒力。方法 通过同源重组构建非复制型痘苗病毒修饰株NTV-C7L,通过病毒的细胞扩散能力和复制能力,以及小鼠呼吸道感染实验和小鼠尾部划痕实验分别评估NTV-C7L的体外和体内毒力。结果 经同源重组蓝白斑纯化获得的非复制型痘苗病毒修饰株NTV-C7L,通过PCR和Western blot鉴定证明C7L基因正确插入并能表达C7L蛋白；在人胚肺成纤维细胞(MRC-5)和小鼠胚胎成纤维细胞(BALB/C 3T3)中,NTV-C7L的扩散能力和复制能力比NTV强,但低于VTT；痘苗病毒小鼠滴鼻实验结果表明,106PFU病毒感染后TTV组小鼠体重与NTV及NTV-C7L组相比,体重下降差异具有统计学意义(t＝6.56,P<0.001；t＝5.73,P<0.001),NTV组与NTV-C7L组相比,体重下降差异无统计学意义(t＝0.597,P＝0.081)；107PFU病毒感染后,NTV组及NTV-C7L组体重下降与TTV组相比,差异具有统计学意义(t＝12.86,P<0.001；t＝10.71,P<0.001)。NTV组与NTV-C7L组相比,体重下降差异具有统计学意义(t＝4.616,P<0.001)。小鼠尾部皮肤划痕实验表明,接种106PFU VTT组小鼠在第5天尾部形成较为明显皮肤红肿、损伤,而107PFU NTV组和NTV-C7L组仅在局部形成红肿,且范围较VTT小,后逐渐结痂愈合。结论 非复制型痘苗病毒修饰株NTV-C7L在细胞内及小鼠体内毒力较NTV升高,但明显低于VTT,为痘苗病毒载体优化及应用提供了参考数据。

• 单位
  中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所