鸡胚电转染-RNA干扰技术在体模型的建立

作者：陈大为; 李瑞国; 刘佳利

来源：中国实验动物学报, 2010, (05): 390-357.

• 鸡胚
• 神经管
• 背根神经节
• RNA抑制
• 在体电转染 Chicken embryo
• Neural tube
• DRG
• RNAi
• in ovo electroporation

目的建立在体鸡胚电转染-RNA干扰技术(RNAi)模型。方法通过SOE-PCR方法,利用shRNA中的Loop环作为交叠区序列成功的建立了一种方便的shRNA表达序列构建方法,将Isl-1特异性的shRNA序列插入到pEGFP-H1-shRNA质粒中,通过注射后电转染,利用免疫组织化学方法检测Isl-1在鸡胚神经管和背根神经节(dorsal root ganglia,DRG)中的表达。结果鸡胚神经管和DRG中Isl-1的表达受到明显抑制。结论成功建立了在体鸡胚电转染-RNAi模型,为以鸡胚为模式动物研究神经管和DRG发育相关基因的功能提供了有力的工具。

• 单位
  中国农业大学; 农业生物技术国家重点实验室; 中国生物技术发展中心