摘要
目的探讨Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)mRNA和蛋白在人卵泡壁颗粒细胞(GCs)和卵丘颗粒细胞(CCs)中的表达水平及变化。方法收集2014年3月至2016年6月期间在华中科技大学同济医学院生殖医学中心接受ICSI治疗的患者卵泡液,其中大卵泡(直径≥18 mm)和小卵泡(≤10 mm)各86份,离心后上清用于Western Blot和ELISA实验,沉淀用密度梯度离心法分离纯化得到GCs;收集脱颗粒细胞的培养液直接离心法获得CCs。GCs和CCs均分别提取mRNA和蛋白,荧光定量PCR检测GCs和CCs中ADAMTS-1 mRNA水平,Western Blot检测ADAMTS-1蛋白水平,比较ADAMTS-1 mRNA和蛋白在不同颗粒细胞中的表达差异。结果 ADAMTS-1 mRNA在大卵泡GCs、小卵泡GCs、CCs中均有表达,且其在小卵泡GCs中表达量最高,显著高于CCs(P<0.05)。ADAMTS-1蛋白在大卵泡GCs、小卵泡GCs、CCs及卵泡液中均有表达,且存在成熟ADAMTS-1蛋白(85 KDa)及前体(110 KDa)两种形式;其在CCs中的表达量最高,显著高于大、小卵泡的GCs(P<0.05),在小卵泡液中的含量显著高于大卵泡液(P<0.01)。结论 ADAMTS-1 mRNA在人卵泡GCs和CCs中均有表达,ADAMTS-1蛋白在人卵泡GCs、CCs和卵泡液中均存在前体和成熟形式,且以成熟形式为主。ADAMTS-1在人卵泡GCs、CCs和卵泡液中的表达特点及变化可能与其在卵泡发育过程中的功能相关。
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单位金华市人民医院; 华中科技大学同济医学院