白细胞介素-35对脓毒症患者CD4+和CD8+T细胞的调控作用

作者：薛彦; 弓清梅^*

来源：中华急诊医学杂志, 2019, (12).

• 脓毒症
• 白细胞介素-35
• 细胞因子
• T淋巴细胞
• 免疫

目的 观察脓毒症(sepsis)患者血浆白细胞介素-35(IL-35)的变化,探讨IL-35对脓毒症患者CD4+和CD8+T细胞的调控作用。方法 采用前瞻性研究方法,选择41例脓毒症患者和19例健康对照者。于就诊本院后1 h内采血,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血浆IL-35水平,流式细胞术检测CD3+、CD4+和CD8+T细胞计数,分析IL-35、T细胞计数与序贯器官衰竭评分(sequential organ failure assessment, SOFA)的相关性。分选脓毒症患者外周血CD4+与CD8+T细胞,使用重组人IL-35刺激培养48 h,实时定量PCR法检测CD4+T细胞中T-bet、GATA-3、FoxP3、RORγt mRNA以及CD8+T细胞中穿溶素、颗粒酶B、FasL mRNA相对表达量；ELISA法检测CD4+T细胞培养上清中的干扰素-γ(IFN-γ)、IL-4、IL-10、IL-17水平和CD8+T细胞培养上清中IFN-γ和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。比较IL-35刺激前后转录因子和细胞因子的变化。结果 脓毒症患者血浆IL-35水平高于对照者[(76.76±10.33) pg/mLvs (27.53±8.31) pg/mL,P<0.01],但与SOFA评分无显著相关性(r=0.172,P=0.281)。脓毒症死亡组(n=11)血浆IL-35水平高于存活组(n=30)[(83.18±6.48) pg/mLvs (74.40±10.55) pg/mL,P=0.014],对两组血浆IL-35水平进行ROC曲线分析,曲线下面积为0.770,P=0.009,预测价值较好。CD3+、CD4+和CD8+T细胞计数在脓毒症和对照者之间、在死亡组和存活组之间的差异均无统计学意义(均P>0.05),但与SOFA评分呈显著负相关(P<0.01)。使用重组人IL-35刺激CD4+T细胞后,Th1转录因子T-bet和Th17转录因子RORγt mRNA降低(P<0.01),而调节性T细胞转录因子FoxP3 mRNA升高(P<0.01),但Th2转录因子GATA-3 mRNA无显著变化(P=0.745)；IL-35刺激后CD4+T细胞分泌IFN-γ和IL-17的水平降低(P<0.05),而IL-10水平提升(P<0.01),但IL-4水平无显著变化(P=0.536)。使用重组人IL-35刺激CD8+T细胞后,穿孔素和颗粒酶B mRNA降低(P<0.01),FasL mRNA无显著变化(P=0.795),分泌IFN-γ和TNF-α的水平亦降低(P<0.05)。结论 血浆IL-35水平升高对脓毒症患者的预后不佳有重要提示意义。IL-35抑制脓毒症患者CD4+T细胞和CD8+T细胞活性,可能参与脓毒症的发病过程。

• 单位
  山西省人民医院