内皮祖细胞条件培养基对间充质干细胞向内皮细胞分化的影响

作者：韩欢欢; 郭黎姣; 杨雄峰; 周青; 姜慧娇; 王小艺; 陈雪玲; 吴向未^*

来源：石河子大学学报(自然科学版), 2019, 37(02): 229-236.

DOI：10.13880/j.cnki.65-1174/n.2019.02.014

• 内皮祖细胞
• 间充质干细胞
• 条件培养基
• 分化
• 内皮细胞

目的探讨体外小鼠内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)条件培养基(CM)对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向内皮细胞(endothelial cells,ECs)分化的影响。方法全骨髓贴壁法和差速贴壁法提取培养MSCs和EPCs,流式细胞术检测MSCs和EPCs表面标记物,双荧光染色和体外成管实验对EPCs进行功能鉴定。将MSCs分为0%EPCs-CM组(对照组)、25%EPCs-CM组和50%EPCs-CM组。qRT-PCR检测各组CD31、v WF、e NOS的mRNA表达水平。体外成管实验检测各组细胞的体外成管能力;免疫荧光检测各组MSCs CD31、CD34表达情况;对各组上清中的NO进行检测。结果流式细胞术结果显示,第3代MSCs高表达Sca-1,低表达CD34、CD11b;EPCs高表达CD34、CD133和VEGFR2,可吞噬Dil-AC-LDL和结合UEA-1。在基质胶上可形成管腔样结构。qRTPCR显示3周时50%EPCs-CM组CD31、v WF、e NOS表达(2. 28±0. 25,1. 76±0. 71,8. 27±1. 65),较对照组显著升高(P<0. 05)。50%EPCs-CM组MSCs可体外形成管腔样结构;免疫荧光显示50%EPCs-CM组MSCs CD31和CD34的表达明显高于对照组。对照组细胞与实验组细胞上清液中NO的含量(8. 81+3. 41,20. 93±9. 47)μmol/L,差异显著(t=3. 96,P<0. 05)。结论 EPCs-CM能提高MSCs体外成管能力,并促进MSCs向ECs分化。

• 单位
  石河子大学医学院第一附属医院; 石河子大学