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摘要
背景肿瘤细胞对传统化学治疗药物产生耐药性是视网膜母细胞瘤(RB)化学疗法失败的主要原因,如何提高化学治疗药物的敏感性是RB治疗过程中亟待解决的问题,已有研究表明全反式维甲酸(ATRA)能够抑制肿瘤细胞的生长,但其是否能够提高肿瘤细胞对传统化学治疗药物的敏感性尚不清楚。目的观察ATRA联合长春新碱对SO-RB50细胞增生的抑制作用。方法对SO-RB50细胞进行常规培养,培养液中分别添加不同浓度的ATRA或不同质量浓度的长春新碱,用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法分别测定ATRA及长春新碱作用48 h后对SO-RB50细胞的半数抑制浓度(IC50)。将常规培养的SO-RB50细胞分为正常对照组、ATRA组、长春新碱组和联合用药组,分别将不同药物根据IC50量添加至培养液进行细胞培养,采用CCK-8法于培养后每24小时检测细胞增生情况,连续测定6 d,绘制细胞生长曲线。用流式细胞仪检测各组细胞用药72 h后不同细胞周期的比例,annexinV/碘化丙啶(PI)法检测各组药物处理48 h后SO-RB50细胞的凋亡情况。结果 ATRA作用于SO-RB50细胞的IC50值为12.84μmol/L,长春新碱为0.11μg/ml。正常对照组SO-RB50细胞生长曲线随着培养时间的延长逐渐上升,但ATRA和长春新碱处理后细胞增生曲线平缓,以联合用药组细胞增生量最低,曲线最平缓。药物作用48 h,正常对照组、ATRA组、长春新碱组和联合用药组细胞的吸光度(A450)分别为1.078±0.022、0.611±0.038、0.596±0.031和0.483±0.030,药物作用72 h分别为1.380±0.021、0.799±0.016、0.668±0.041和0.532±0.033,总体比较差异有统计学意义(F分组=1115.207,P=0.000;F时间=257.781,P=0.000),ATRA组、长春新碱组和联合用药组A450值均明显低于正常对照组,差异均有统计学意义(均P=0.000)。SO-RB50细胞经药物处理后72 h,各组细胞周期发生变化,与正常对照组比较,ATRA组G0/G1期细胞比例显著增加,S期细胞百分数显著减少,长春新碱组G0/G1期细胞百分数减少,而G2/M期细胞比例显著增加,总体比较差异有统计学意义(FC_/G1=130.565、Fs=57.435、FG2/M=114.290,均P<0.05)。SO-RB50细胞经药物处理48 h后,正常对照组、ATRA组、长春新碱组及联合用药组细胞的凋亡率分别为(7.17±0.18)%、(27.34±1.36)%、(27.49±2.45)%和(34.50±1.84)%,总体差异有统计学意义(F=147.555,P<0.05),联合用药组的细胞凋亡率显著高于正常对照组、ATRA组和长春新碱组,差异均有统计学意义(均P=0.000)。结论 ATRA可以在一定程度上提高SO-RB50细胞对长春新碱治疗的敏感性,2种药物的联合应用可增强对SO-RB50细胞的抑制作用,其作用机制可能与参与细胞周期调控、促进细胞凋亡有关。
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单位首都医科大学附属北京同仁医院; 北京市眼科研究所; 哈尔滨医科大学附属第二医院; 首都儿科研究所附属儿童医院
