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摘要
【目的】拟分离1株对大肠杆菌具有良好抑菌效果且适应性广泛的噬菌体，为开发新的大肠杆菌防治方法提供基础。【方法】以大肠杆菌H11为宿主菌，采用双层琼脂平板法从污水样品中分离纯化1株大肠杆菌噬菌体，电镜下观察噬菌体的形态，测定噬菌体的效价、宿主谱、最佳感染复数、一步生长曲线、pH稳定性与温度敏感性，对噬菌体的全基因组进行分析和序列比对，并探究该噬菌体在液体培养基中对H11的抑制效果。【结果】成功分离到1株裂解性大肠杆菌噬菌体，命名为EP＿H11(登录号：OP688485)。双层琼脂平板法结果显示，该噬菌体能够形成大小一致、中间有透明亮点、周围有光晕的噬斑，噬菌体裂解效价可达109～1010 PFU/mL。电镜观察显示噬菌体EP＿H11头部呈规则的多面体状，直径约85 nm,尾部直径约23 nm,长度约109 nm。以大肠杆菌H11为宿主菌测得EP＿H11的最佳感染复数是0.1,一步生长曲线结果显示其潜伏期为40 min,爆发期为80 min,裂解量为200 PFU/cell。该噬菌体在pH 4.0～10.0的环境中至少可以存活2 h以上，并能够在10～60℃下保持稳定90 min。结合透射电镜观察及全基因组分析结果显示，噬菌体EP＿H11属于有尾病毒目、长尾噬菌体科、肌尾噬菌体属。噬菌体基因组总片段长度为111 373 bp, GC含量为44.49%。噬菌体线性对比结果显示，大肠杆菌噬菌体EP＿H11的基因组与噬菌体Escherichia phage vB＿EcoM＿IME392同源性最高。系统发育进化树分析结果表明，噬菌体EP＿H11与肌尾属噬菌体Escherichia phage vB＿EcoM＿IME392位于同一分支，均属于有尾噬菌体目、长尾噬菌体科。经BLAST比对分析显示，噬菌体EP＿H11基因组中共有153个CDSs,其中28个CDSs编码功能蛋白。体外抑菌结果显示，8 h内，EP＿H11在MOI为10时表现出良好的抑菌效果。【结论】本研究分离到1株裂解性极强，适应性范围较广，体外抑菌效果良好的噬菌体。该噬菌体具有进一步开发成为大肠杆菌抗菌剂的潜力。
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