一种同时分离培养大鼠肝细胞及肝枯否细胞技术的建立

作者：王敏; 兰亚; 胡皓; 时永全; 韩英; 周新民

来源：现代生物医学进展, 2013, (13): 2420-2424.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2013.13.001

• 肝细胞
• 枯否细胞
• 分离方法
• 大鼠 Hepatocyte
• Kupffer cell
• Isolation methods
• Rat

目的:建立简便、经济的同步分离培养肝细胞及kupffer细胞的方法。方法:采用肝脏原位灌洗结合离体胶原酶灌注消化的方法获得总细胞悬液,差速离心分离肝细胞及肝非实质细胞,经多次低速离心可分离肝细胞,经percoll密度梯度离心以及选择性贴壁法得到纯化的kupffer细胞。台盼蓝染色鉴定细胞活力。使用倒置相差显微镜、HE染色、PAS染色及白蛋白免疫组织化学染色对培养肝细胞的形态及功能进行检测。使用光学显微镜、荧光显微镜及CD68免疫荧光染色鉴定分离的kupffer细胞。结果:体外成功的同步分离培养了肝细胞及kupffer细胞,肝细胞产率为1.37±0.53×108/大鼠,kupffer得率为3.4...

• 单位
  肿瘤生物学国家重点实验室; 第四军医大学; 延安大学附属医院