重组免疫毒素的纯化及鉴定

作者：刘树雷; 何威; 王儒鹏

来源：免疫学杂志, 2012, (02): 128-132+137.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20120029

• 免疫毒素
• hIL-2
• LuffinP1
• 银屑病
• 靶向治疗 Immunotoxin
• hIL-2
• LuffinP1
• Purification
• Identification

目的构建能特异性杀伤银屑病皮损中T淋巴细胞的重组免疫毒素hIL-2-Luffin P1。方法应用PCR扩增目的基因片段hIL2-Luffin P1,然后克隆到表达载体pET32a(+)中,并对重组质粒进行酶切鉴定及基因测序。测序正确的重组质粒转化到表达菌BL21中,进行诱导表达。诱导表达正确的蛋白,经过蛋白的纯化、复性、脱盐、肠激酶酶切、再纯化,最后用兔抗人IL-2多克隆抗体对目的蛋白进行Western blot鉴定。结果构建了pET32a(+)-hIL-2-Luffin P1表达载体。最后得到了表达正确的hIL2-Luffin P1蛋白。结论重组免疫毒素hIL-2-Luffin P1的成功构...

• 单位
  新桥医院; 中国人民解放军第三二四医院