小鼠FGF21基因克隆及his-mFGF21融合蛋白的诱导表达

作者：唐青蓝; 李红梅^*; 张礼林; 王玉丰; 颜礼完; 周君

来源：贵州医科大学学报, 2019, 44(05): 552-556.

DOI：10.19367/j.cnki.1000-2707.2019.05.011

• 成纤维细胞生长因子
• 基因克隆
• 融合蛋白
• 诱导表达
• 蛋白纯化

目的:对小鼠FGF21基因进行克隆并诱导表达FGF21融合蛋白。方法:以带有小鼠FGF21的T载体pMD19-T-mFGF21为模板特异性扩增FGF21基因片段,将扩增产物克隆至pET-28a(+),得到pET-28a(+)-mFGF21的重组子,并转化于大肠杆菌BL21(DE3),使用IPTG诱导融合蛋白的表达,纯化后采用Western Blot进行鉴定。结果:pET-28(+)-mFGF21重组质粒构建成功,表达出可溶性的his-mFGF21融合蛋白,经纯化后该蛋白his-mFGF21可与FGF21抗体特异性结合。结论:成功构建pET-28(+)-mFGF21重组子,并表达出his-mFGF21蛋白。

• 单位
  贵州医科大学; 海南省第三人民医院