盐单胞菌属BYS-1四氢嘧啶合成基因ectABC克隆及其盐激表达

作者：何健; 黄星; 顾立锋; 蒋建东; 李顺鹏

来源：微生物学报, 2006, 46(01): 28-32.

DOI：10.3321/j.issn:0001-6209.2006.01.007

• 四氢嘧啶
• ectABC基因
• SEFA-PCR
• Halomonassp.BYS-1
• 盐激表达

利用SEFA-PCR技术从中度嗜盐菌Halomonassp.BYS-1总DNA中克隆了四氢嘧啶合成基因ectABC及其上游序列(GenBank accession number DQ017757);OMIGA软件分析结果显示ectA、ectB、ectC位于同一个操纵子上,大小分别为573bp1、251bp和387bp,预测编码的DAT(L-二氨基丁酸转氨酶)、DAA(L-二氨基丁酸乙酰转移酶)和ES(四氢嘧啶合酶)大小分别为21.1kDa(191 amino acid)、45.7kDa(417 amino acid)和14.5kDa(129 amino acid);将包含ectABC基因及其上游1000bp序列的片段克隆到pUC19中并转化E.coliDH5α,转化子E.coli(pUC19ECT)能够在盐激条件下合成四氢嘧啶,但其耐盐能力没有得到显著改善。

• 单位
  生命科学学院; 农业部; 南京农业大学