NEK7/NLRP3信号通路在小鼠脓毒症相关性脑病中的作用

作者：李昭颖; 孙美莎; 李艳; 章放香^*; 王斌^*

来源：中华麻醉学杂志, 2022, 42(11).

• NIMA相关激酶7
• NLR家族, 热蛋白结构域包含蛋白3
• 脓毒症相关性脑病

目的评价NIMA相关激酶7/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NEK7/NLRP3)信号通路在小鼠脓毒症相关性脑病中的作用。方法健康成年雄性C57BL/6小鼠150只, 8～12周龄, 体重20～25 g, 采用随机数字表法分为5组(n=30):假手术组(Sham组)、脓毒症组(CLP组)、脓毒症+NLRP3抑制剂MCC950组(CLP+MCC950组)、脓毒症+NEK7 siRNA组(CLP+NEK7 siRNA组)和脓毒症+NC siRNA组(CLP+NC siRNA组)。采用经典的盲肠结扎穿孔法制备脓毒症模型。术后连续3 d, CLP+MCC950组每天腹腔注射MCC950 10 mg/kg, Sham组每天腹腔注射等量生理盐水。分别于术毕即刻和术后第3天, CLP+ NEK7 siRNA组脑室注射NEK7 siRNA 3 nmol/20 g, Sham组脑室注射相同剂量NC siRNA。术后第4天记录小鼠生存情况。分别于术后第4和7天, 每组取10只小鼠行Y迷宫空间识别实验。术后第7天, 每组随机处死5只小鼠, 麻醉后取海马组织, 采用ELISA法检测IL-1β、IL-18和TNF-α含量;每组随机处死6只小鼠, 取海马组织, 采用Western blot法检测NEK7、NLRP3、活化的半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1(cleaved-caspase-1)和凋亡相关点样蛋白(ASC)的表达。结果术后第4天, Sham组、CLP组、CLP+MCC950组和CLP+NEK7 siRNA组、CLP+NC siRNA组小鼠生存率分别为100%、50%、73%、60%、53%。与Sham组相比, CLP组术后第4和7天时新异臂进入频次减少, 停留时间缩短, 术后第7天海马组织IL-1β、IL-18和TNF-α含量升高, NEK7、NLRP3、cleaved-caspase-1和ASC表达上调(P<0.05);与CLP组相比, CLP+MCC950组和CLP+NEK7 siRNA组术后第4和7天新异臂进入频次增多, 停留时间延长, 术后第7天海马组织IL-1β、IL-18和TNF-α含量降低, CLP+MCC950组海马组织NLRP3、cleaved-caspase-1和ASC表达下调, CLP+NEK7 siRNA组海马组织NEK7、NLRP3、cleaved-caspase-1和ASC表达下调(P<0.05), CLP+NC siRNA组上述各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 NEK7/NLRP3信号通路参与了小鼠SAE的过程, 其机制可能与促进炎症反应有关。

• 单位
  贵州医科大学; 贵州省人民医院