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摘要
目的:研究加味阳和汤对破骨细胞活性的影响,并基于NF-κB信号通路探讨其作用机制。方法:制备加味阳和汤含药血清,用RAW264.7细胞诱导培养破骨细胞,CCK8法筛选出实验给药浓度,干预破骨细胞,收集细胞培养上清,检测并计算各组TRAP酶活力值,Western Blot法检测破骨细胞细胞质IκB-α和细胞核p65蛋白表达,计算各组蛋白灰度值,分析各组数值差异有无统计学意义。结果:CCK8结果显示5%、10%、20%浓度的加味阳和汤血清对RAW264.7细胞活性无明显影响(P>0.05)。细胞上清TRAP酶活力值显示:与诱导组比,加味阳和汤血清组酶活力值下降,20%浓度组下降更为显著,差异有统计学意义(P<0.01)。WB结果显示:与生理盐水组比,诱导组细胞核p65蛋白表达量明显增加;与诱导组比,含药血清组p65蛋白表达量下降,且含药血清浓度越高,p65蛋白表达量越低,差异有统计学意义(P<0.01);与生理盐水组相比,诱导组细胞质IκB-α蛋白表达量下降,与诱导组相比,含药血清组IκB-α蛋白表达量增高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:加味阳和汤可以抑制破骨细胞的活性,降低破骨细胞分泌的抗酒石酸酸性磷酸酶活性,其作用可能与其抑制NF-κB信号通路有关。
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