5-AZA抑制人葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的研究

作者：黄一睿^*; 何卫; 李锐; 蒋自培

来源：中华全科医学, 2019, 17(06): 969-973.

DOI：10.16766/j.cnki.issn.1674-4152.000838

• 5-氮杂胞苷
• 葡萄膜黑色素瘤
• p21
• 细胞周期

目的 DNA甲基化是一种重要的表观修饰,由DNA甲基化转移酶介导完成,与癌症的发生密切相关。目前,已发现至少有50个与黑色素瘤发生发展相关的关键基因发生异常超甲基化修饰,而DNA甲基化酶抑制剂能抑制DNA甲基转移酶活性,具有调控甲基化状态的潜能。本研究旨在探讨DNA甲基化酶抑制剂5-AZA对人葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的影响并初步研究其作用的分子机制。方法 4μM 5-AZA处理OCM-1和OCM-3细胞作为实验组,同时溶剂DMSO处理细胞作为对照组,通过MTS[3-(4,5-diethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-etrazolium,inner salt,MTS]实验和细胞克隆形成实验检测5-AZA对细胞增殖的作用;采用流式细胞术分析5-AZA作用于细胞后细胞周期的变化;通过细胞划痕实验评估5-AZA对细胞迁移的影响;分别应用Real-time PCR和Western blotting技术检测5-AZA对细胞周期相关蛋白基因表达水平;所得实验数据使用t检验判定实验组和对照组之间差异是否具有统计学意义。结果 5-AZA显著抑制人葡萄膜黑色素瘤细胞增殖(P<0.01)以及细胞克隆形成能力;5-AZA诱导人葡萄膜黑色素瘤细胞G1期阻滞;5-AZA对人葡萄膜黑色素瘤细胞迁移影响不明显;5-AZA显著促进葡萄膜黑色素瘤细胞p21表达上调(P<0.01),抑制CDK2表达(P<0.01)。结论 5-AZA能通过上调p21和下调CDK2抑制人葡萄膜黑色素瘤细胞增殖,可作为治疗葡萄膜黑色素瘤的潜在药物。

• 单位
  温州市中西医结合医院; 温州医科大学附属第一医院