亚临床低钙血症奶牛外周血中性粒细胞的糖异生作用下降

作者：张伟; 何雨欣; 麻芯茹; 吕鑫泉; 李铭; 李思瑶; 杨威; 徐闯; 张冰冰

来源：中国兽医学报, 2023, 43(06): 1315-1320.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2023.06.30

• Ca2+
• 亚临床低钙血症
• 中性粒细胞
• 糖异生

为研究胞内Ca2+对亚临床低钙血症奶牛外周血中性粒细胞糖异生作用的影响，用枸橼酸钠抗凝管采集奶牛尾静脉血液分离中性粒细胞；对中性粒细胞进行RNA测序及分析，利用qRT-PCR技术对其进行验证；通过流式细胞术检测胞内Ca2+水平；Western blot技术检测钙池调控钙离子进入（store-operated calcium entry, SOCE）分子（ORAI1、ORAI2、ORAI3、STIM1、STIM2）的表达情况。添加SOCE激活剂Thapsigargin（TG）改变细胞内Ca2+水平，探究Ca2+水平对糖异生作用的影响。RNA测序结果分析发现，差异基因富集在Ca2+信号通路和糖异生作用通路上，qRT-PCR结果显示亚临床低钙血症奶牛的糖异生作用（FBP1、PKM2、G-6-Pase、PFKFBF3、AKR1B1）与正常奶牛相比下降；流式细胞术结果显示，亚临床低钙血症奶牛胞内Ca2+水平下降；Western blot结果显示，亚临床低钙血症奶牛SOCE分子表达下降。在TG处理后，胞内Ca2+水平上升，糖异生作用显著上升。结果表明，中性粒细胞内Ca2+水平影响糖异生作用。

• 单位
  黑龙江八一农垦大学; 动物科技学院; 生命科学技术学院