丙泊酚对脂多糖诱导的MHCC97H细胞增殖、凋亡和迁移的影响

作者：秦李杨; 刁玉刚^*; 韩晓航

来源：山西医科大学学报, 2023, 54(10): 1307-1313.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2023.10.002

• 肝癌
• 丙泊酚
• 核转录因子-κB信号通路
• 增殖
• 凋亡
• 迁移

目的 探究丙泊酚对脂多糖(LPS)诱导的人肝癌细胞增殖、凋亡、迁移、炎症因子的影响及其机制。方法 体外培养人肝癌MHCC97H细胞系，分为对照组、LPS组、丙泊酚低剂量组、中剂量组、高剂量组和中剂量+BAY 11-7082组。对照组细胞不做干预，LPS组以1μg/ml LPS处理，低剂量组、中剂量组、高剂量组分别以1μg/ml LPS和12.5,25,50μmol/L丙泊酚同时给药处理，中剂量+BAY 11-7082组以1μg/ml LPS、25μmol/L丙泊酚和10μmol/L NF-κB通路抑制剂BAY 11-7082同时给药共培养处理，均干预24 h。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达，活细胞计数(CCK-8)检测细胞活力，5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)检测细胞增殖，Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡，Transwell小室检测细胞迁移能力，蛋白免疫印迹(WB)法检测细胞周期素D1(Cyclin D1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、IKKα、IκBα、p-IκBα、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白水平。结果 与对照组相比，LPS组细胞炎症因子TNF-α表达水平和细胞活力显著升高(P<0.05);与LPS组相比，中剂量组和高剂量组炎症因子TNF-α表达水平和细胞活力显著降低(P<0.05),其中高剂量组细胞活力较低，故选择中剂量25μmol/L丙泊酚进行后续实验。与对照组相比，LPS组细胞增殖率、迁移数及Cyclin D1、IKKα、p-IκBα和p-NF-κB p65蛋白表达显著升高，细胞凋亡率和Caspase-3蛋白表达显著降低(均P<0.05);与LPS组相比，中剂量组细胞增殖率、迁移数及Cyclin D1、IKKα、p-IκBα和p-NF-κB p65蛋白表达显著降低(P<0.05),细胞凋亡率和Caspase-3蛋白表达显著升高(P<0.05);与中剂量组比较，中剂量+BAY 11-7082组细胞增殖率、迁移数及Cyclin D1、IKKα、p-IκBα和p-NF-κB p65蛋白表达显著降低(P<0.05),细胞凋亡率和Caspase-3蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论 丙泊酚可显著抑制LPS诱导的人肝癌MHCC97H细胞的炎症、增殖及迁移，诱导MHCC97H细胞凋亡，其作用机制可能与抑制NF-κB通路的信号转导相关。