摘要

目的:探讨聚四氟乙烯(PTFE)人工血管携载血管内皮生长因子(VEGF)基因并转染移植部位组织细胞的可行性。方法:将pCD I-hVEGF121质粒溶液处理过的PTFE人工血管修剪成细条,溴化乙锭(EB)标记,在紫外光下观察其吸附基因质粒的情况。将经质粒溶液处理的血管材料置于生理盐水,并于不同的时间检测溶液的吸光度,计算出溶液的VEGF基因质粒浓度,绘出体外释放曲线。将经质粒溶液处理的血管材料(基因组,n=24)和经白蛋白溶液处理的血管材料(对照组,n=24)分别植入家兔左、右大腿肌肉,实验按不同的时间,经RT-PCR半定量检测移植血管材料周围骨骼肌中VEGF121mRNA表达水平,W estern b lot检测VEGF121蛋白表达。结果:吸附了VEGF基因质粒的血管材料经EB标记后,在紫外光下呈蓝紫荧光。体外释放曲线显示0.5~4 h基因释放较快,随后进入缓慢增长期,直至72 h仍有基因的释放,但释放速率明显减慢。RT-PCR和W esternb lot显示,PTFE埋植后第1天、1周、2周、4周、6周和8周的标本hVEGF121mRNA相对于-βactinmRNA的表达量,分别为1.053±0.356、1.718±0.404、2.021±0.303、1.872±0.231、0.986±0.254和0.340±0.116;VEGF121蛋白相对表达量为0.328±0.088、1.019±0.105、2.249±0.203、2.036±0.079、1.670±0.132和0.636±0.107。结论:PTFE血管材料能携载VEGF基因质粒并进行骨骼肌的转染。

  • 单位
    浙江大学医学院附属第二医院

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