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摘要
采用CCK-8法、荧光定量PCR(RT-PCR)法、蛋白免疫印迹(Western blot)法和活性氧(ROS)测定方法,探讨喜树有效成分喜树碱(CPT)及其衍生物10-羟基喜树碱(HCPT)和盐酸伊立替康(CPT-11)对肝肿瘤细胞SMMC-7721增殖的影响。实验结果表明,SMMC-7721细胞在暴露于CPT-11和HCPT(40μg·m L-1和80μg·m L-1)24 h和48 h后,细胞增殖受到显著抑制(P<0.05)。细胞凋亡检测结果表明,细胞以浓度依赖性方式凋亡。RT-PCR检测结果显示,过氧化氢酶基因(CAT)和超氧化物歧化酶基因(SOD1)的m RNA表达水平显著下降(P<0.05)。Westernblot分析证实,CAT和SOD1蛋白表达下调与RT-PCR检测结果一致。ROS检测结果显示,CPT/HCPT/CPT-11显著促进ROS的产生(P<0.05)。所以,CPT/HCPT/CPT-11可下调细胞抗氧化相关基因CAT和SOD1的表达,抑制细胞增殖,显示出抗肿瘤活性,对肝肿瘤细胞的临床治疗有一定的参考价值。
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