来源于葡萄球菌的N-乙酰神经氨酸裂合酶的基因克隆及性质

作者：周传华; 陈曦; 冯进辉; 肖冬光; 吴洽庆; 朱敦明

来源：生物工程学报, 2013, (04): 480-489.

DOI：10.13345/j.cjb.2013.04.010

• 葡萄球菌
• N-乙酰神经氨酸裂合酶
• 表达
• 纯化
• 生物催化 Staphylococcus hominis
• N-acetylneuraminate lyase
• expression
• purification
• biocatalysis

葡萄球菌Staphylococcus hominis来源的N-乙酰神经氨酸裂合酶基因shnal(GenBank Accession No.EFS20452.1)构建至pET-28a质粒并在大肠杆菌中得到表达。通过目的蛋白的纯化和酶学性质研究发现,ShNAL是一个四聚体,裂解方向的最适反应pH为8.0;合成方向的最适反应pH为7.5,最适反应温度为45℃。在45℃下孵育2 h对ShNAL的活力基本无影响,高于45℃时,活力迅速下降。该酶在pH 5.0~10.0的环境中比较稳定,4℃下放置24 h酶的残余活力在70%以上。ShNAL对N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)、N-乙酰甘露糖胺(Man)和丙...

• 单位
  天津科技大学; 中国科学院天津工业生物技术研究所