RNA干扰DGAT1和DGAT2基因在猪肝细胞中的表达

作者：吴光松; 李平; 顾丽菊; 林鹏飞; 任丽群; 杨蓉; 黄维江; 张芸; 毛同辉; 魏小红; 田松军; 燕志宏^*

来源：河南农业科学, 2018, 47(08): 123-127.

DOI：10.15933/j.cnki.1004-3268.2018.08.020

• RNA干扰
• DGAT1基因
• DGAT2基因
• 肝细胞
• 甘油三酯

为了探索DGAT1和DGAT2基因对宗地花猪脂肪沉积效率的影响,以宗地花猪为试验动物,针对基因DGAT1和DGAT2 mRNA序列设计6对shRNA序列,构建RNA干扰表达载体,将DGAT1和DGAT2的shRNA干扰载体分别转染至肝细胞中,采用荧光定量PCR筛选出最佳shRNA干扰载体,并测定最佳干扰组细胞代谢液中甘油三酯和总胆固醇含量变化。结果显示,所构建的6个shRNA干扰载体均能抑制肝细胞中目的基因的表达,肝细胞中DGAT1和DGAT2基因的最高抑制效率分别为78.45%和87.52%。转染干扰效率最佳的载体p GPU6/GFP/Neo-DGAT1-1和p GPU6/GFP/Neo-DGAT2-1后,肝细胞培养液中甘油三酯和总胆固醇含量均降低,两者差异不显著(P>0.05)。转染p GPU6/GFP/Neo-DGAT2-1的肝细胞培养液中甘油三酯含量显著低于空白组(P<0.05),DGAT1干扰载体的干扰效率略低于DGAT2干扰载体(P>0.05)。综上,抑制DGAT1和DGAT2基因的表达,可降低肝细胞培养液中甘油三酯和总胆固醇含量。

• 单位
  动物科学学院; 贵州大学