摘要
目的 探讨微小RNA-340 (miR-340)对神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)增殖、迁移的影响及其作用机制。方法 选择2018年10月至2020年12月在延安大学附属医院进行手术治疗的23例神经母细胞瘤及其瘤旁组织标本进行实验研究;体外培养SH-SY5Y细胞,将细胞分为对照组、miR-340过表达(miR-340 mimics)组、miR-340阴性对照组(negative control,NC)组、miR-340 mimics+pcDNA组及miR-340 mimics+SKP2组,分别检测肿瘤组织和瘤旁组织、各组SH-SY5Y细胞miR-340、SKP2mRNA表达及各组细胞增殖、迁移侵袭及SKP2、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9表达;双荧光素酶报告实验验证miR-340与SKP2的靶向关系。结果 神经母细胞瘤组织中miR-340表达水平为0.55±0.08,明显低于瘤旁组织的1.05±0.15,SKP2 mRNA表达水平为1.96±0.20,明显高于瘤旁组织的1.01±0.11,差异均有统计学意义(P<0.05);双荧光素酶报告实验表明miR-340与SKP2存在靶向调控关系;与对照组和miR-340 NC组相比,miR-340 mimics组SH-SY5Y细胞miR-340表达水平显著升高,细胞存活率、划痕迁移率、侵袭数、SKP2 m RNA和蛋白表达、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与miR-340 mimics组和miR-340 mimics+pcDNA组比较,miR-340 mimics+SKP2组细胞存活率、划痕迁移率、侵袭数、SKP2 mRNA及蛋白、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 神经母细胞瘤中miR-340低表达,过表达miR-340可抑制SH-SY5Y细胞增殖、迁移与侵袭,其机制可能与下调SKP2表达有关。
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单位延安大学附属医院; 西安市第三医院