边缘无浆体MSP5蛋白基因的克隆及原核表达

作者：马米玲; 罗建勋; 殷宏; 关贵全; 李有全; 刘志杰; 高金亮; 刘爱红; 任巧云; 刘军龙; 赵海平; 王凡

来源：中国兽医科学, 2007, (07): 578-582.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2007.07.006

• 边缘无浆体
• MSP5蛋白基因
• 克隆
• 原核表达 Anaplasma marginale
• MSP5 gene
• cloning
• prokaryotic expression

参照已发表的边缘无浆体主要表面蛋白5(MSP5)基因的核苷酸序列,设计了1对特异性引物,以边缘无浆体基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增获得了MSP5蛋白基因。将其克隆到pGEM-T Easy载体,并进行测序分析。结果表明,克隆的MSP5基因与GenBank上登录的Florida株MSP5蛋白基因的序列同源性达98.6%,编码氨基酸的同源性为99.0%,并且该序列包含有完整的开放阅读框,大小为633 bp。将该基因亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,构建了重组原核表达载体。将其转化到DH5α宿主菌中,用IPTG进行诱导表达,实现了融合表达,表达产物的分子质量为45 ku。Western-...

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所