科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
【目的】扩增猪血清和糖皮质激素诱导型激酶(SGK)家族基因并进行生物信息学分析，探索其在猪脂肪组织和细胞中的表达模式。【方法】以藏猪脂肪细胞cDNA为模板PCR扩增SGK家族基因，通过在线工具预测其编码蛋白的理化性质及亚细胞定位；用Mega X软件构建系统进化树；采集30日龄巴马猪心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、背肌、腿肌、颈部脂肪、背部脂肪、腹股沟脂肪、肾周脂肪等组织及7日龄和4月龄猪腹股沟脂肪组织，通过实时荧光定量PCR检测SGK家族基因在猪不同部位组织中的表达；采集30日龄巴马猪腹股沟脂肪组织并分离基质血管成分(SVF)细胞，诱导SVF细胞向白色脂肪细胞分化，通过实时荧光定量PCR检测SGK家族基因及脂肪分化标记基因CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)在脂肪细胞中的表达。【结果】SGK1、SGK2和SGK3基因CDS区序列长度分别为1 296、1 104和1 473 bp,分别编码431、367和490个氨基酸；SGK1和SGK2定位于细胞质，SGK3定位于细胞核，三者均为亲水性蛋白，3个蛋白均含有相同基序，保守性高；系统进化树结果表明，猪与牛的亲缘关系最近；SGK1和SGK3基因在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、多种肌肉及脂肪组织广泛表达，SGK2基因在颈部、背部、腹股沟、肾周脂肪组织中均有较高表达；SGK1和SGK2基因在7日龄猪脂肪组织中表达量极显著高于4月龄猪脂肪组织(P0.05),且SGK3基因的表达量低于SGK1和SGK2基因；与未分化脂肪细胞相比，在分化后的脂肪细胞中SGK1和SGK2基因的表达量极显著上调(P0.05)。【结论】SGK家族蛋白具有保守结构域，可能发挥着相似的功能，SGK1和SGK2可能参与调控猪脂肪细胞的分化过程，结果可为探究猪脂肪沉积的分子机制提供一定的理论基础。
- 单位
