摘要
【目的】研究养殖场鸡饮水中肺炎克雷伯氏菌的耐药表型和耐药基因的携带情况,并分析其相关性,为有效预防该病提供参考。【方法】从养殖场鸡饮水系统中分离、鉴定肺炎克雷伯氏菌(Klebsiellapneumoniae),采用药敏纸片扩散法检测分离菌株对25种常用抗菌药的耐药性,通过聚合酶链式反应(PCR)检测菌株携带常见的耐药基因。对其中4株肺炎克雷伯氏菌进行全基因组测序,分析预测耐药基因的携带情况。【结果】从养殖场鸡饮水系统中共分离到9株肺炎克雷伯氏菌;药敏试验表明这些菌株呈现出多重耐药,仅对多粘菌素敏感;通过PCR检测发现,9株肺炎克雷伯氏菌总共携带13种常见的耐药基因,其中β-内酰胺酶类耐药基因CMY-1、BlaSHV和 BlaCTX-M、碳青霉烯类耐药基因KPC、喹诺酮类耐药基因QnrB、QnrS和QnrA、氨基糖苷类耐药基因Aph(3`)-Ia、磺胺类耐药基因Sul2等12种耐药基因与其耐药表型表现一致,而Mcr-1一基因与其表型相反;全基因组扫描分析结果,4株肺炎克雷伯氏菌共携带了59种耐药基因,涉及34类抗生素药物,其中四环素类抗生素的耐药基因最多,其次是大环内酯类抗生素和氟喹诺酮类抗生素耐药基因;预测到覆盖度和同源性均在98%以上的耐药基因共有20种,分别为FosA6、CRP、Klebsiella pneumoniae KpnF、Klebsiella pneumoniae KpnFG、Klebsiella pneumoniae KpnE、OqxA、OqsB、SHV-11、Tet(D)、CTX-M-27、QnrB65、DHA-1、APH(4)-Ia、MsrE、QnrB2、APH(3’)-Ia、Sul1、CmlA6、FloR、AadA12、ANT(3’’)-IIa、ArmA、Sul2。【结论】在养殖场鸡饮水中分离到的肺炎克雷伯氏菌的耐药性严重,携带多种耐药基因,这对家禽抗生素使用和公共卫生管理具有重要的参考价值,值得高度关注。
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