重组枯草芽孢杆菌全细胞催化合成钙二醇的初步研究

作者：李雨虹; 耿鹏; 刘建民; 时祎; 辛瑜; 石贵阳; 张梁^*

来源：食品与发酵工业, 2021, 47(12): 17-22.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.026522

• 钙二醇(25-hydroxy vitamin D3, 25-OH VD3)
• 枯草芽孢杆菌
• VD3羟化酶
• 异源表达
• 全细胞催化

钙二醇(25-hydroxy vitamin D3,25-OH VD3)是一种具有广泛生理活性及药用价值的物质。该文旨在通过分子生物学手段构建1株异源表达VD3羟化酶(VD3 hydroxylase, Vdh)的重组枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis WB600/pMA5-vdh,使其可以利用细胞催化系统合成25-OH VD3。该重组菌株经诱导表达后,首先利用CO差光谱法评价Vdh的体外活性,并将其用作全细胞催化剂合成25-OH VD3,随后通过优化温度、时间、转速及pH等全细胞转化条件,提高其转化合成25-OH VD3的产量。结果表明,37℃下培养24 h后,重组枯草芽孢杆菌B.subtilis WB600/pMA5-vdh的菌体裂解物酶活力达0.56 nmol/g;并且在底物质量浓度为0.1 g/L、外加18 g/L葡萄糖和22.5 g/L的2-羟丙基-β-环糊精的条件下,控制初始pH为7、反应温度30℃、转速200 r/min时进行全细胞转化反应48 h,得到25-OH VD3的转化率为10.36%,以上研究结果为制备和生产食品级25-OH VD3提供了新的思路。

• 单位
  生物工程学院; 江南大学