葡聚糖结合蛋白的原核表达及检测深部真菌感染的应用

作者：朱李茹; 黄友明; 章宏祥; 周发友; 唐晓磊^*

来源：基础医学与临床, 2022, 42(06): 883-889.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2022.06.007

• 深部真菌感染
• 葡聚糖结合蛋白
• 夹心法
• 临床应用

目的 验证葡聚糖特异性的结合蛋白用于检测深部真菌感染(IFI)患者血清中(1,3)-β-D-葡聚糖的应用价值。方法 通过构建美洲鲎葡聚糖结合蛋白(GBP)252位氨基酸至668位氨基酸活性区域表达质粒——pET30a-GBP252-668,表达并纯化获得GBP252-668重组蛋白。随后通过棋盘法构建双GBP252-668夹心法，并以此检测IFI患者血清中(1,3)-β-D-葡聚糖。同时与G试验(G-Test)进行检测性能的比对。结果 成功纯化获得分子质量约为46 ku的GBP252-668重组蛋白，并确定最佳包被浓度和检测浓度分别为8和16 g/L,以此构建了GBP252-668夹心法。对48名深部真菌感染患者和48名健康人血清进行检测，根据受试者工作特征曲线(ROC)可得其灵敏度为91.67%,特异度为89.58%。其灵敏度与G-Test相当，特异性高于同批次G-Test(79.17%)。结论 本研究构建的双GBP夹心法是一种极具潜力检测侵袭性真菌的方法，其灵敏度与G-Test相当，特异性高于同批次G-Test。

• 单位
  襄阳市中心医院; 湖北文理学院; 皖南医学院第二附属医院