人参皂苷Rg3对人乳腺癌MCF-7细胞血管生成拟态的影响

作者：黎国栋; 杨慧; 陆颖

来源：天津医药, 2016, 44(09): 1069-1186.

• 乳腺肿瘤
• 血管内皮生长因子A
• 基质金属蛋白酶9
• 低氧诱导因子-1α
• MCF-7细胞
• 血管生成拟态
• 人参皂苷Rg3

目的探讨人参皂苷Rg3对人乳腺癌MCF-7细胞体外血管生成拟态的抑制作用及其机制。方法取MCF-7对数生长期细胞分为实验组和对照组,实验组加入含有终浓度为10、20、50、100、150及300 mg/L的Rg3完全培养基;对照组加入含DMSO完全培养基。CCK-8法分析Rg3对MCF-7细胞增殖的影响,分析实验组各浓度下的抑制率和Rg3半数抑制浓度(IC50)并确定实验浓度。体外管道形成抑制实验观察Rg3对MCF-7细胞血管生成拟态的影响。实时荧光定量PCR法检测Rg3对细胞血管内皮生长因子-A(VEGF-A)和基质金属蛋白酶(MMP)9m RNA的表达水平的影响。蛋白免疫印迹法检测Rg3对细胞低氧诱导因子(HIF)-1α、VEGF-A和MMP9蛋白表达的影响。双抗夹心酶联免疫法测定Rg3对细胞培养上清液中VEGF-A、MMP9蛋白表达的影响。结果人参皂苷Rg3可以有效抑制MCF-7细胞增殖,其平均IC50为(115.34±8.50)mg/L;选取50、100和150 mg/L的Rg3作为实验浓度。50、100和150 mg/L组形成的管状结构数目分别为(19.0±1.0)、(15.0±1.5)、(10.0±1.7)个/视野,呈逐渐降低趋势;且均较对照组(22.0±1.8)减少(均P<0.05)。对照组、50 mg/L组、100 mg/L组及150 mg/L组细胞中的VEGF-A和MMP9的m RNA和蛋白表达水平、HIF-1α的蛋白表达水平均呈逐渐下降趋势(P<0.05)。对照组、50 mg/L组、100 mg/L组及150 mg/L组细胞培养上清液中的VEGF-A蛋白呈逐渐下降趋势(P<0.05);后3组的MMP9蛋白表达水平均呈逐渐下降趋势(P<0.05),但50 mg/L组与对照组的MMP9蛋白表达水平差异无统计学意义。结论人参皂苷Rg3可以抑制MCF-7细胞体外血管形成拟态的能力,其分子机制可能与抑制MCF-7细胞中HIF-1α、VEGF-A和MMP9的蛋白表达有关。

• 单位
  广西医科大学第四附属医院; 柳州市工人医院