PI3K/Akt信号通路的异常活化对婴幼儿血管瘤内皮细胞凋亡的抑制作用

作者：吉毅; 陈思源; 李凯; 肖现民; 郑珊; 徐挺

来源：中华小儿外科杂志, 2014, 35(02): 93-96.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0253-3006.2014.02.004

• 血管瘤
• 内皮细胞
• 血管内皮生长因子
• 磷脂酰肌醇-3-激酶
• 蛋白激酶
• 细胞凋亡

目的对比婴幼儿血管瘤内皮细胞(HemEC)与普通的脐静脉内皮细胞(HUVEC)中PI3K/Akt信号通路活化状态,探讨其对HemEC凋亡的影响与机制。方法无血清培养环境下诱导血管内皮细胞凋亡。应用Annexin V/PI双染流式细胞仪术、Hoechst33342与TUNEL荧光染色检测观察细胞凋亡的状态。采用Western blot技术检测VEGF、Akt与磷酸化Akt在HemEC和HUVEC中的表达或活化状态。应用PI3K抑制剂LY294002处理血清饥饿的血管内皮细胞,观察其对细胞凋亡的影响。结果无血清培养12 h后,可见HUVEC凋亡明显较对照组增多(P<0.05);,而HemEC凋亡增多不明显(P>0.05)。无血清培养24 h或48 h后,HemEC中出现增多的凋亡细胞,但显著低于HUVEC(P<0.05)。Western blot检测发现,与HUVEC相比,HemEC中Akt的活性显著升高。使用LY294002抑制HemEC中PI3K/Akt的活性后,HemEC凋亡率显著升高(P<0.05),而LY294002对HUVEC凋亡的影响不明显(P>0.05)。结论在离体细胞实验条件下,异常活化的PI3K/Akt信号通路能显著抑制缺血环境下的HemEC发生自发性凋亡。

• 单位
  复旦大学附属儿科医院; 四川大学华西医院