薏苡仁中呕吐毒素酶联免疫检测方法的建立

作者：刘云翔; 周荣荣; 詹志来; 康利平; 南铁贵^*; 袁媛^*

来源：中国中药杂志, 2022, 47(24): 6581-6586.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20220918.102

• 薏苡仁
• 呕吐毒素
• 单克隆抗体
• 酶联免疫检测法

薏苡仁为药食同源的常用大宗药材，具有利水渗湿、健脾止泻的功效。其原植物薏苡为禾本科植物，在生长过程中由于气候原因易受禾谷镰刀菌Fusarium graminearum和黄色镰刀菌F.culmorum等产生呕吐毒素等多种真菌污染。《中国药典》2351真菌毒素测定法中呕吐毒素检测方法为高效液相色谱(HPLC)和液相色谱-串联质谱(LC-MS),检测周期长，费时、费力，不能满足药品的现场质量检测要求。通过将呕吐毒素进行化学衍生，与蛋白偶联后获得呕吐毒素的完全抗原。利用抗体制备技术，制备呕吐毒素的单克隆抗体，通过方法学考察，进而建立薏苡仁中呕吐毒素的酶联免疫检测方法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)。基于薏苡仁中呕吐毒素ELISA的IC50为3.88μg·L-1,加样回收率为77.32%～93.73%,RSD为4.6%～9.7%。利用所建立的ELISA方法，测定了14批薏苡仁样品中的呕吐毒素残留量，并使用LC-MS进行验证，发现2种检测方法测定结果相关性为0.997 8,表明所建立的酶联免疫方法可用于薏苡仁中呕吐毒素残留量的定量检测，可以实现薏苡仁中呕吐毒素残留的快速定量检测。

• 单位
  南通市第三人民医院; 道地药材国家重点实验室; 中国中医科学院