一株耐盐芽孢杆菌的筛选及其蛋白酶的酶学特性研究

作者：曹凯; 邓国志; 胡晓婕; 张家胜; 武超^*

来源：安徽农业大学学报, 2019, 46(02): 312-317.

DOI：10.13610/j.cnki.1672-352x.20190507.013

• 花津浦芽孢杆菌
• 耐盐菌
• 蛋白酶
• 条件优化

从浙江舟山的盐场中分离出了一株耐盐菌,结合生理生化实验及16S rDNA基因序列鉴定结果,表明菌株CK-1为Bacillus的未定种,其系统分类学关系与花津浦芽孢杆菌(Bacillushwajinpoensis)种最近,命名为Bacillussp.CK-1。经研究,该菌最适生长NaCl浓度为4%,且能在20%NaCl浓度下生长,表明其为耐盐菌。对其分泌的蛋白酶进行了表征和培养条件的优化。经研究发现,该蛋白酶在pH 8.0和45℃具有最高的蛋白酶活性,并在8%NaCl浓度下仍能保持44.9%的活性。对发酵培养基的优化结果表明,蔗糖、淀粉和麦芽糖均对蛋白酶的生产有明显的促进作用。随着发酵培养基中NaCl浓度的测试表明,该菌分泌的蛋白酶活性随着NaCl浓度的变化呈现先增大后减小的趋势,并在12%NaCl浓度时该菌分泌的蛋白酶酶活达到最高。Ca2+对发酵液中的蛋白酶活性具有明显的促进作用,表明其为Ca2+依赖蛋白酶。经优化,在含有KCl 2.0 g·L-1、Na HCO3 0.06 g·L-1、FeCl3 0.001 g·L-1、NaCl 120.0 g·L-1、CaCl2·2H2O 1 mmol·L-1、麦芽糖10 g·L-1、tryptone 10 g·L-1和初始pH 7.5的培养基中,于40℃发酵培养5 h后,Bacillus sp. CK-1所产蛋白酶具有最大的活性。

• 单位
  安徽大学