重组人神经肽Y受体Y1融合蛋白的表达、纯化及其生物信息学分析研究

作者：丁克祥; 董萍; 郑永晨; 杨永鹏; 朱晓亮; 韩晋云; 单志新; 丁宇; 丁振华

来源：中国老年学杂志, 2009, (18): 2331-2334.

• 人神经肽YY1受体
• 融合蛋白
• 包涵体
• 纯化
• 生物信息学 NeuropeptideY Y1 receptor
• Fusion protein
• Inclusion body
• Purification
• Bioinformatics

目的在大肠杆菌中表达人神经肽YY1受体,并对之进行纯化、鉴定及生物信息学分析。方法取已构建好且经测序确认无误的重组质粒pET28a-Y1转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白,并经SDS-PAGE检测和Western Blot鉴定,表达产物包涵体经Ni2+-NTA亲和层析纯化。然后利用相关在线软件进行生物信息学分析Y1受体蛋白。结果经IPTG诱导含有pET28a-Y1重组质粒的DE3菌,表达出重组人Y1融合蛋白。重组蛋白经Ni2+-NTA亲和层析进行纯化后,得到了较高纯度的融合蛋白。经相关在线软件分析后获得了Y1受体的相关生物学特性。结论重组质粒pET28a-Y1在大肠杆菌DE3中成功表达,亲和层析纯化后获得较高纯度融合蛋白,并对Y1受体蛋白的生物学特征进行了预测,为进一步研究其生物学功能及其抗体的研制奠定了基础。

• 单位
  南方医科大学; 吉林大学; 南方医院; 华中科技大学同济医学院附属同济医院