阿米卡星调控微小RNA-223对脂多糖诱导的肺泡上皮细胞凋亡以及肿瘤坏死因子α、白细胞介素6表达的影响

作者：孙利平; 宋亚玲; 李春艳^*

来源：安徽医药, 2022, 26(07): 1310-1314.

• 阿米卡星
• 微小RNA-223
• 肺泡上皮细胞
• 细胞凋亡
• 炎症反应
• 急性肺损伤

目的 探讨阿米卡星对脂多糖（LPS）诱导的肺泡上皮细胞凋亡以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素（IL）-6表达的影响和分子机制。方法 该研究于2020年1—7月完成，采用LPS诱导肺泡上皮细胞，构建急性肺损伤细胞模型。将肺泡上皮细胞分为对照组、模型组（LPS处理24 h）、实验组（由LPS和不同剂量的阿米卡星处理24 h）、anti-miR-NC组（转染微小RNA阴性对照后进行LPS处理）、anti-miR-223组（转染微小RNA-223抑制剂后进行LPS处理）、实验3+miR-NC组（转染微小RNA阴性对照后进行LPS和15μg/L阿米卡星处理）、实验3+miR-223组（转染微小RNA-223激动剂后进行LPS和15μg/L阿米卡星处理）。流式细胞术检测细胞凋亡；蛋白质印迹法（Western blotting）检测兔源裂解的胱天蛋白酶3(cl-caspase3)表达。酶联免疫吸附测定（ELISA）检测细胞上清液中TNF-α和IL-6含量。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-223（微小RNA-223）表达。结果 与对照组比较，模型组肺泡上皮细胞凋亡率（25.81±1.82）%、cl-caspase3(0.81±0.06)和miR-223表达（0.17±0.02）、细胞上清液中TNF-α(793.92±34.49)ng/L和IL-6含量（412.04±23.94）ng/L升高（P <0.05）。与模型组比较，实验组肺泡上皮细胞凋亡率（22.07±1.69）%、cl-caspase3(0.68±0.05)和miR-223表达（0.28±0.03）、细胞上清液中TNF-α(478.38±25.85)ng/L和IL-6含量（202.95±15.55）ng/L降低（P<0.05）。与anti-miR-NC组比较，anti-miR-223组肺泡上皮细胞凋亡率（10.12±1.13）%、cl-caspase3(0.27±0.03)和miR-223表达（1.69±0.08）、细胞上清液中TNF-α(403.48±29.94)ng/L和IL-6含量（166.35±15.61）ng/L降低（P<0.05）。与实验3+miR-NC组比较，实验3+miR-223组肺泡上皮细胞凋亡率（24.03±1.64）%、cl-caspase3(0.75±0.06)和miR-223表达（4.67±0.22）、细胞上清液中TNF-α(726.18±33.57)ng/L和IL-6含量（385.07±22.15）ng/L升高（P<0.05）。结论 阿米卡星对LPS诱导的肺泡上皮细胞具有明显的抗炎和抗凋亡作用，其机制可能与抑制miR-223表达有关。