发酵饲料中乳酸菌含量检测的EMA-qPCR方法

作者：胡会龙; 魏小兵; 王秋霞; 欧长波; 闫艺婷; 吕玉琼; 刘兴友^*

来源：畜牧兽医学报, 2019, 50(10): 2166-2170.

• 叠氮溴乙锭
• 实时荧光定量PCR
• 乳酸菌含量

旨在快速检测发酵饲料中乳酸菌含量,将叠氮溴乙锭(EMA)与q-PCR技术相结合,通过对诸如EMA浓度、曝光时间等影响EMA的因素进行探索,确定EMA的作用条件。在试验条件下用EMA处理已知浓度的乳酸菌菌液,提取乳酸菌DNA,结合q-PCR建立Ct值与乳酸菌含量对数值之间的标准曲线。利用标准曲线,快速计算发酵饲料中的乳酸菌含量。结果表明EMA浓度在3～4μg·mL-1曝光10 min可有效抑制死菌DNA的扩增,从而消除死菌DNA扩增对Ct值的影响。通过对8份发酵饲料进行检测,其结果与平板计数具有较高的符合度。EMA-qPCR方法可用于快速准确地检测发酵饲料中活的乳酸菌含量。

• 单位
  新乡学院; 动物科技学院; 河南科技学院