摘要
目的探讨蔓荆子提取物对小鼠造血系统辐射损伤的防护作用。方法 (1)体外细胞实验:提取小鼠骨髓细胞, 将骨髓细胞分为对照组、蔓荆子组、照射组和蔓荆子+照射组, 蔓荆子组的给药浓度为0.01 mg/ml和0.001 mg/ml, 蔓荆子+照射组的给药浓度为0.001 mg/mL, 照射组和蔓荆子+照射组细胞经1 Gy照射。使用酶标仪检测细胞活力, 异硫氰酸荧光素(FITC)通道检测细胞的活性氧(ROS)水平, FITC和藻红蛋白(PE)通道检测细胞的凋亡水平。(2)体内实验:采用简单随机抽样法将15只C57BL/6小鼠分为对照组(n=5)、照射组(n=5)和蔓荆子+照射组(n=5)。对照组小鼠进行假照射(0 Gy), 照射组和蔓荆子+照射组小鼠进行一次性2 Gy全身照射。将蔓荆子提取物用二甲基亚砜(DMSO)配制为500 mg/ml的蔓荆子溶液, 灌胃前用生理盐水稀释, 蔓荆子+照射组小鼠于照射前给予蔓荆子提取物(400 mg/kg)0.2 ml, 连续给药7 d, 照射后10 d处死小鼠。使用全自动血液分析仪分别对外周血血细胞和骨髓有核细胞(BMNC)计数, 使用流式细胞仪分析造血干/祖细胞的数量和百分比, 检测骨髓造血细胞内ROS水平、人磷酸化组蛋白H2A变异体(γH2AX)和磷酸化的p38(pp38)的表达。符合正态分布的计量资料的2组间比较采用独立样本t检验(方差齐)。结果 (1)体外细胞实验:与照射组比较, 0.001 mg/mL蔓荆子+照射组的骨髓细胞活力明显提高(585 485.00±37 335.80对460 384.55±53 786.37), ROS水平降低(12 260.67±232.34对17 969.67±467.24), 凋亡细胞百分比显著降低[(28.97±0.32)%对(35.33±0.35)%], 且差异均有统计学意义(t=4.245、18.950、23.161, 均P<0.01)。(2)体内实验:与照射组相比, 蔓荆子+照射组小鼠的BMNC数量[(23.34±3.01)×106个/只对(16.73±2.57)× 106个/只]、白细胞数量[(2.80±0.35)×109个/L对(2.21±0.24)×109个/L]、红细胞数量[(10.54± 0.51)×1012个/L对(9.68±0.26)×1012个/L]、血小板数量[(339.80±49.42)×109个/L对(289.40±54.08)× 109个/L]和血红蛋白含量[(139.20±3.66)g/L对(129.20±3.87)g/L]均升高, 且差异均有统计学意义(t=2.582、2.824、2.999、1.376、9.739, 均P<0.01)。与照射组比校, 蔓荆子+照射组小鼠造血祖细胞的数量[(34 916.03±697.36)个/只对(26 388.04±241.78)个/只]和百分比[(29.83±4.32)%对(22.76±2.20)%]升高, 造血干细胞的数量[(2 074.00±23.12)个/只对(929.40±166.52)个/只]升高, 且差异均有统计学意义(t=5.423、9.171、3.175, 均P<0.01);造血干/祖细胞中的ROS水平下降[(7 750.20±589.05)对(8 515.20±1 036.46), (9 360.20±831.97)对(10 291.40±767.57)], 差异均无统计学意义(t=1.435、1.839, P=0.189、0.103);造血干/祖细胞中γH2AX的表达降低(693.20±4.82对751.60±32.72), 且差异有统计学意义(t=3.064, P<0.01);造血干/祖细胞中pp38表达降低(1 181.20±11.28对1 183.60±49.70, 1 411.20±50.25对1 424.40±80.95), 差异均无统计学意义(t=0.105、0.765, P=0.014、0.310)。结论蔓荆子提取物通过降低造血细胞的氧化应激和抑制造血干细胞内的DNA损伤来达到辐射防护效果。
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单位放射医学研究所; 天津医科大学; 中国医学科学院北京协和医学院